¿ÞÂÊ ¸Þ´º ŸÀÌƲ À̹ÌÁö
Áֿ伺°ú

Home < Áֿ伺°ú < Áֿ伺°ú

       Àúºñ¿ë °íÈ¿À² ¸ÂÃãÇü ¹Ì»ý¹° °Ë»ö Ç÷§Æû °³¹ß
               
       ISBC        2018.09.04 15:27        5079
 

Àúºñ¿ë °íÈ¿À² ¸ÂÃãÇü ¹Ì»ý¹° °Ë»ö Ç÷§Æû °³¹ß


Çѱ¹»ý¸í°øÇבּ¸¿ø ±èÇϼº ¹Ú»ç, À̽±¸ ¹Ú»ç


Haseong Kim, Eugene Rha, Wonjae Seong, Soo-Jin Yeom, Dae-Hee Lee, and Seung-Goo Lee*, A Cell-Cell Communication-Based Screening System for Novel Microbes with Target Enzyme Activities. ACS Synth. Biol., 2016, 5 (11), pp 1231?1238


1. ¿¬±¸¹è°æ


¹Ì»ý¹°Àº Áö±¸»ó »ý¸íü ¹«°ÔÀÇ 60%¸¦ Â÷ÁöÇÒ Á¤µµ·Î ¹«ÇÑÇÏ¸ç ±âÈĺ¯È­¿¡¼­ Áúº´¿¡ À̸£±â±îÁö °ÅÀÇ ¸ðµç »ý¸íÇö»ó¿¡ °ü·ÃµÇ¾î ÀÖ´Ù. ÃÖ±Ù ÀÎü/°¡Ãà/ÀÛ¹°¿¡ °ø»ýÇÏ¸ç °Ç°­¿¡ ±â¿©Çϰųª ÀÚ¿¬È¯°æÀ» Á¤È­ÇÏ°í C1°¡½º µî ź¼ÒÀÚ¿øÀ» À¯¿ë È­Çй°Áú·Î ÀüȯÇÏ´Â ¹Ì»ý¹°±â¼úÀÇ °³¹ß¿¡ ´ëÇÑ °ü½ÉÀÌ ³ô¾ÆÁö°í ÀÖ´Ù. ÀÌ·¯ÇÑ ¹Ì»ý¹°ÀÇ È°¿ë°¡Ä¡´Â ¹«ÇÑÈ÷ dzºÎÇÑ À¯ÀüÀÚ ±â´É¿¡ µû¸¥ °ÍÀ̸ç, ÀÌ´Â ÀüÀÚ»ê¾÷ÀÇ ¹ÝµµÃ¼±â¼úó·³ ¹ÙÀÌ¿À»ê¾÷¿¡¼­µµ ¹Ì»ý¹°°ú È¿¼ÒÀÚ¿øÀÇ È®º¸°¡ Áß¿äÇÑ ÀÌÀ¯ÀÌ´Ù. ±×·¯³ª ÀüÅëÀûÀÎ ¹Ì»ý¹°ÀÚ¿ø È®º¸±â¼úÀº ƯÁ¤ÇÑ ¸î¸î ´Ü¹éÁúµéÀÇ È°¼ºÀ» ³ëµ¿Áý¾àÀûÀ¸·Î ÃøÁ¤Çϰųª °í°¡ÀÇ ÀÚµ¿È­ Àåºñ¿¡ ÀÇÁ¸ÇÏ°í ÀÖÀ¸¸ç, ¹Ì»ý¹°ÀÇ »ýÈ­ÇÐÀû ±â´ÉÀ» Á÷Á¢ °üÂûÇÒ ¼ö ÀÖ´Â ±â¼úÀº ±ØÈ÷ Á¦ÇѵǾî ÀÖ´Ù. 


º» ¿¬±¸ÁøÀº Žħ¹°Áú(designed substrates)¿¡ ¹ÝÀÀÇÏ¿© À¯ÀüÀÚȸ·Î¸¦ ±¸µ¿½ÃÅ´À¸·Î½á ¹ÌÁöÀÇ ¹Ì»ý¹° ¶Ç´Â È¿¼ÒÀÇ ±â´ÉÀ» ´ë·®À¸·Î Ž»öÇÒ ¼ö ÀÖ´Â À¯ÀüÀÚȸ·Î(genetic circuits)¸¦ °³¹ßÇÏ¿´´Ù [1, 2]. À̴ Žħ¹°ÁúÀÌ Æ¯Á¤ »ýÈ­ÇÐÀû È¿¼Ò È°¼º¿¡ ÀÇÇØ  ¹Ì»ý¹°°£ Åë½Å¿ë ½ÅÈ£¹°Áú·Î º¯È¯µÇ¾î ±ÙÁ¢ÇÑ ¹Ì»ý¹°ÀÌ Çü±¤´Ü¹éÁú°ú Çʼö¿µ¾ç¼Ò¸¦ ¸¸µé¾î ³»µµ·Ï À¯µµÇÏ´Â ¹æ¹ýÀ¸·Î ÇØ´ç ¹Ì»ý¹°À» ¸íÈ®ÇÏ°Ô °¡½ÃÈ­ ÇÏ´Â È¿°ú¿Í ºÐÀÚ¿µ»ó±â¼úÀ» Àû¿ëÇÑ °ÍÀÌ´Ù. ÀÌ ¹æ¹ýÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© °øÀå ±Ùó ÇϼöÅä¾ç À¯·¡ ¹Ì»ý¹° ±ºÀ» °í»ó ¹è¾çÇÑ ÈÄ Å½Ä§¹°Áú (Å»ÀλêÈ¿¼Ò °¨Áö¸¦ À§ÇÑ phenyl-phosphate)°ú Æä³î°¨Áö À¯ÀüÀÚȸ·Î¸¦ ÀåÂøÇÑ ´ëÀå±ÕÀ» ó¸®ÇÏ¿´´Ù. ½Ã·á Áß¿¡ Å»ÀλêÈ¿¼Ò¸¦ º¸À¯ÇÑ ¹Ì»ý¹°ÀÌ Á¸ÀçÇÏ´Â °æ¿ì ÇØ´ç ¹Ì»ý¹°ÀÇ ÁÖÀ§¿¡ Çü±¤»ö µ¿±×¶ó¹Ì°¡ Çü¼ºµÇ¾î È°¼ºÀÌ ¾ø´Â ¼¼Æ÷µé°ú ½Ã°¢ÀûÀ¸·Î È®¿¬È÷ ±¸ºÐµÇ¾ú°í Å»ÀλêÈ°¼ºÀ» °®´Â ½Å±Ô ¹Ì»ý¹°À» ¿ëÀÌÇÏ°Ô È®º¸ÇÒ ¼ö ÀÖÀ½À» º¸¿´´Ù.


2. ¿¬±¸°á°ú


¸ÕÀú °³¹ßÇÑ À¯ÀüÀÚȸ·ÎÀÇ ÀÛµ¿À» °ËÁõÇϱâ À§ÇÏ¿© tyrosine phenol-lyase (TPL) È¿¼Ò¸¦ º¸À¯ÇÑ ¹Ì»ý¹°À» TPLÀÇ ±âÁúÀÎ tyrosine (Žħ¹°Áú)°ú ÇÔ²² °í»ó¹èÁö¿¡ ¹è¾çÇÏ°í À¯ÀüÀÚȸ·Î¸¦ žÀçÇÑ ´ëÀå±Õ ¼¾¼­¼¼Æ÷¸¦ °ø¹è¾ç ÇÑ °æ¿ì TPLÀÌ Å½Ä§¹°Áú¿¡ ÀÛ¿ëÇÏ¿© phenolÀ» ¸¸µé¾î³»°í ±× ÁÖÀ§¿¡¼­ ¹è¾çµÈ ´ëÀå±Õ ¼¼Æ÷µé¿¡¼­ Çü±¤À» º¸ÀÌ´Â °á°ú¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ¾ú´Ù (±×¸² 1).



±×¸² 1. °¨Áö¼¾¼­ ÀÛµ¿ ¸ð½Äµµ: Èĺ¸ ¹Ì»ý¹°ÀÌ Å½Ä§¹°Áú(designed substrates)¿¡ ÀÛ¿ëÇÏ´Â °æ¿ì ½ÅÈ£¹°Áú(phenol)ÀÌ ¸¸µé¾îÁö°í ¼¾¼­¹Ì»ý¹° ³» À¯ÀüÀÚȸ·Î´Â ÀÌ¿¡ ¹ÝÀÀÇÏ¿© Çʼö¿µ¾ç¼Ò »ý»ê(D-AAT) ¹× Çü±¤½ÅÈ£(GFP)¸¦ ¹ß»ý½ÃÅ´. ÀÌ·¯ÇÑ ¿ø¸®¿¡ ÀÇÇØ Æ¯Á¤ ¹Ì»ý¹° ÁÖº¯¿¡ Çü±¤µ¿±×¶ó¹Ì°¡ »ý°Ü³ª¹Ç·Î ¸ñÇ¥ÇÑ È¿¼ÒÈ°¼ºÀ» ¼Õ½±°Ô È®ÀÎ ÇÒ ¼ö ÀÖÀ½.


ÀÌ·¯ÇÑ ¼¼Æ÷³» È¿¼ÒÈ°¼ºÀ» °¨ÁöÇÏ´Â ¹æ¹ýÀº ¹ÌÁöÀÇ ¹Ì»ý¹°°ú Žħ¹°Áú ±×¸®°í ¼¾¼­ ¹Ì»ý¹°À» °í»ó ¹èÁö¿¡¼­ °°ÀÌ ¹è¾çÇÏ´Â ¸Å¿ì °£´ÜÇÑ ¹æ¹ýÀÌ¸ç °í°¡ÀÇ Çü±¤ ºÐ¼®±â (sorter)°¡ ÇÊ¿ä ¾øÀÌ º¸±ÞÇü Çü±¤ À̹ÌÁö ºÐ¼®±â·Îµµ ½±°Ô È°¼º ¹Ì»ý¹°À» ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Ù´Â ÀåÁ¡ÀÌ ÀÖ´Ù (±×¸² 2).

±×¸² 2. °£´ÜÇÑ ½ÇÇè¹æ¹ý: ¹Ì»ý¹° ±ºÁýÀ» °í»ó¹èÁö¿¡¼­ Å°¿î ÈÄ Å½Ä§¹°Áú°ú À¯ÀüÀÚȸ·Î žÀç ´ëÀå±ÕÀ» ½ºÇÁ·¹À̷Πó¸®ÇÔ. ÇÏ·ç ¹è¾ç ÈÄ À̹ÌÁö¸¦ ºÐ¼®ÇÏ°í, ÇÊ¿ä ½Ã À¯ÀüÀÚ ºÐ¼® ÁøÇà.


½ÇÁ¦ ÀÌ ¹æ¹ýÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© Å»ÀλêÈ¿¼ÒÀÇ È°¼ºÀ» °®´Â ±ÕÁÖ¸¦ Ž»öÇÏ¿´´Ù. ¸ÕÀú °øÀå±Ùó Çϼö Åä¾ç¿¡¼­ ¾òÀº ¹Ì»ý¹° ±ºÀ» źÀλêÈ¿¼ÒÀÇ Å½Ä§¹°Áú (phenyl-phosphate)¿Í ÇÔ²² °í»ó ¹èÁö¿¡ ¹è¾çÇÏ°í ÀÏÁ¤ ½Ã°£ÀÌ Áö³­ ÈÄ À¯ÀüÀÚȸ·Î¸¦ ÀåÂøÇÑ ¼¾¼­¼¼Æ÷¸¦ ó¸®ÇÏ¿´´Ù. ½Ã·á Áß¿¡ Å»ÀλêÈ¿¼Ò¸¦ º¸À¯ÇÑ ¹Ì»ý¹°ÀÌ Á¸ÀçÇÏ´Â °æ¿ì ÇØ´ç ¹Ì»ý¹°ÀÇ ÁÖÀ§¿¡ Çü±¤»ö µ¿±×¶ó¹Ì°¡ Çü¼ºµÇ¾î È°¼ºÀÌ ¾ø´Â ¼¼Æ÷µé°ú ½Ã°¢ÀûÀ¸·Î È®¿¬È÷ ±¸ºÐµÇ¾ú°í À̵éÀ» ´ÜÀÏ ÄݷδϷΠ¼±º°ÇÏ¿© ¼¼Æ÷ Æļâ¾×ÀÇ ½ÇÁ¦ Å»ÀλêÈ­ È¿¼Ò È°¼ºÀ» ÃøÁ¤ÇÑ °á°ú ¼±º° ÄݷδÏÀÇ ¾à 70%ÀÌ»óÀÌ ÇØ´ç È¿¼ÒÀÇ È°¼ºÀ» °¡Áö°í ÀÖ´Â °ÍÀ¸·Î ¹àÇôÁ³´Ù.



±×¸² 3. ÇÏõ Åä¾ç¿¡¼­ Å»ÀλêÈ­ ¹Ì»ý¹°±â´É ºÐ¼®. (A) ½ÅźÁø °©Ãµ ÀαÙÀÇ Çϼö Åä¾ç ¹Ì»ý¹° ±ºÁý¿¡¼­ phosphatase È°¼º ºÐ¼®. ¼¾¼­¼¼Æ÷¿¡ ÀÇÇØ Çü±¤À» º¸ÀÌ´Â 24°³ ÄÝ·Î´Ï ¼±Åà (B) ¼±ÅÃµÈ ¹Ì»ý¹°µéÀÇ Æļâ¾×¿¡¼­ phosphatase È°¼ºÀ» Á÷Á¢ ÃøÁ¤ÇÑ °á°ú ¼±ÅÃµÈ ¹Ì»ý¹° Áß ¾à 70% ÀÌ»óÀÇ °³Ã¼¿¡¼­ phosphatase È°¼ºÀÌ °üÂûµÊ.


3. ¿¬±¸ÀÇ ¼º°ú ¹× ÀÇÀÇ


º» ±â¼úÀº Žħ¹°Áú¸¸ º¯°æÇÏ´Â ¹æ¹ýÀ¸·Î µ¿½Ã¿¡ ´Ù¾çÇÑ È¿¼ÒÈ°¼ºÀ» ºÐ¼®ÇÒ ¼ö ÀÖÀ¸¸ç, ÃÖ¼Ò 300¿© Á¾ÀÇ ´Ù¾çÇÑ È¿¼ÒÈ°¼º¿¡ Àû¿ëÇÒ ¼ö ÀÖ´Â ³ôÀº È®À强À» °®´Â ±â¼úÀÌ´Ù. À̸¦ µ¿¹°ÀÇ Àå³»¹Ì»ý¹°À̳ª ±ØÇÑȯ°æ¹Ì»ý¹° µî¿¡ Àû¿ëÇÏ¸é ¹Ì»ý¹°±ºÁý ºÐ¼®, ¹ÙÀÌ¿ÀÃ˸ŠȮº¸ ¹× ´ë»ç°æ·Î°³¹ß µî¿¡ ±â¿©ÇÒ °ÍÀ¸·Î ¿¹»óµÈ´Ù.


¶ÇÇÑ º» ±â¼úÀº °¨Áö/½ÅÈ£ÁõÆø/¼¼Æ÷°£Åë½Å/°¡½ÃÈ­ µîÀÇ Àΰø ±â´ÉÀ» À¯ÀüÀÚȸ·Î¿¡¼­ ±¸ÇöÇÑ ÇÕ¼º»ý¹°Çбâ¼ú·Î¼­ ÀÌ È¸·Î¸¦ µµÀÔÇÑ ´ëÀå±ÕÀº °í°¡ÀÇ Àåºñ³ª ¼÷·ÃÀÌ ¾øÀ̵µ ¿øÇÏ´Â ±â´ÉÀÇ ¹Ì»ý¹°À» ½±°Ô ¹ß±¼ÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù. ƯÈ÷ ±âÁ¸±â¼ú°ú ´Þ¸® ¼¼Æ÷ Æļ⳪ DNA ÃßÃâ °úÁ¤ ¾øÀÌ »ì¾ÆÀÖ´Â ±×´ë·ÎÀÇ ¹Ì»ý¹°À» ºü¸£°Ô °üÂûÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù´Â Á¡¿¡¼­ È°¿ë °¡Ä¡°¡ ³ô´Ù°í ÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù.


Âü°í¹®Çå
1. Haseong Kim, Eugene Rha, Wonjae Seong, Soo-Jin Yeom, Dae-Hee Lee, and Seung-Goo Lee*, A Cell-Cell Communication-Based Screening System for Novel Microbes with Target Enzyme Activities. ACS Synth. Biol., 2016, 5.11, 1231?1238
2. Su-Lim Cho, Eugene Rha, Sang Jun Lee, Haseong Kim, Kilkoang Kwon, Young-Su Jeong, Young Ha Rhee, Jae Jun Song, Hak-Sung Kim, and Seung-Goo Lee. Toward a generalized and high-throughput enzyme screening system based on artificial genetic circuits. ACS Synth. Biol., 2013 3.3, 163-171.








Total:45 page:(3/1)
45 Á¤º¸ ISBC ÀÚ¿¬»ìÇؼ¼Æ÷ ¼¼Æ÷»ìÇØÈ°¼º °áÇÔ°ú ÃéÀå¾Ï ¿¹ÈÄ¿¬.. 20.04.14 2522
44 Á¤º¸ ISBC À¯ÀüÀÚ°¡ ÃÖ¼ÒÈ­µÈ ´ëÀå±ÕÀÇ µ¶Æ¯ÇÑ »ýÀå¿ø¸® ±Ô.. 20.04.14 1910
43 Á¤º¸ ISBC ¹æ¼±±Õ Streptomyces clavuligerusÀÇ ÀÏÂ÷ Àü»çü.. 20.04.14 2319
42 Á¤º¸ ISBC È¿¸ð ¼¼Æ÷ ³» Á¶È¿¼Ò(NADPH) »ý»ê Àç¼³°è¸¦ ÅëÇÑ .. 20.04.14 2554
41 Á¤º¸ ISBC °í°¨µµ À̼ÒÇÁ·» °¨Áö ¹ÙÀÌ¿À¼¾¼­ÀÇ °³¹ß ¹× Àû¿ë 20.04.13 2254
40 Á¤º¸ ISBC °øÆ÷¹ÝÀÀ °áÁ¤ ÀüµÎ¿± ³ú½Å°æȸ·Î ±Ô¸í 20.04.13 2579
39 Á¤º¸ ISBC ÀÚ¿¬»ìÇؼ¼Æ÷ÀÇ Ç×¾ÏÈ°¼º ÁõÁøÀ» À§ÇÑ ¸é¿ª°ü¹® .. 20.04.13 1446
38 Á¤º¸ ISBC »ýÇÕ¼º µÈ ¿¤µµÆÄ(L-DOPA)ÀÇ À¯ÀüÀû µµÀÔ ½Ã½ºÅÛ .. 20.04.13 2461
37 Á¤º¸ ISBC ģȯ°æ ¹æÇâÁ· Æú¸®¿¡½ºÅ׸£ »ý»ê ½Ã½ºÅÛ °³¹ß 20.04.13 2458
36 Á¤º¸ ISBC CRISPR/Cas9 ½Ã½ºÅÛ ¿ªÈ¿°ú ±Ô¸í ¹× ¹ßÇö ÃÖÀûÈ­.. 20.04.13 1930
35 Á¤º¸ ISBC ÇÕ¼º Á¶Àý sRNA¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ À¯ÀüÀÚ ¹ßÇö ¹Ì¼¼Á¶Àý .. 20.04.13 4653
34 Á¤º¸ ISBC °£ ´ë½Ä¼¼Æ÷ ¸Å°³ ºñ¾ËÄڿüº Áö¹æ°£ À¯µµ ±âÀü .. 20.04.13 2033
33 Á¤º¸ ISBC ÀúºÎ°¡°¡Ä¡ ¹ÙÀÌ¿À¸Å½º¸¦ ÅëÇÑ °íºÎ°¡°¡Ä¡ ÀÚÀÏ·Ð.. 20.04.09 2146
32 Á¤º¸ ISBC ±Ý¼ÓÇ×»ó¼ºÀ» È°¿ëÇÑ ¹æ¼±±ÕÀÇ ´ë»ç»ý¸® Á¶Àý 18.09.14 2592
31 Á¤º¸ ISBC Cellulose Binding Domain À¶ÇÕ¿¡ ÀÇÇÑ È¿¼Ò ´Ü¹é.. 18.09.14 2632
30 Á¤º¸ ISBC ¹Ì»ý¹°·ÎºÎÅÍ Çöó½ºÆ½ÀÇ ÁÖ ¿ø·áÀÎ Å×·¹ÇÁÅ»»ê .. 18.09.14 3888
[1] [2] [3]