¿ÞÂÊ ¸Þ´º ŸÀÌƲ À̹ÌÁö
Áֿ伺°ú

Home < Áֿ伺°ú < Áֿ伺°ú

       ºû¿¡ ÀÇÇÑ Tetracycline ÀÇ Tet Repressor ´Ü¹éÁú¿¡ÀÇ °áÇÕ·Â Á¶Àý
               
       ISBC        2018.08.23 16:07        2351
 

ºû¿¡ ÀÇÇÑ Tetracycline ÀÇ Tet Repressor ´Ü¹éÁú¿¡ÀÇ °áÇÕ·Â Á¶Àý

¼­¿ï´ëÇб³ ÀÌÁö¿¬ ±³¼ö


Light-Regulated Tetracycline Binding to the Tet Repressor, Chem. Eur. J. 2014, 20, 2508-2514


1. ¿¬±¸¹è°æ


»ì¾ÆÀÖ´Â ¼¼Æ÷´Â ¿ÜºÎȯ°æÀÇ º¯È­¿¡ ÀûÀÀÇÏ´Â È¿°úÀûÀÎ ¹æ¹ýÀ» °¡Áú ¼ö ÀÖµµ·Ï ÁøÈ­ÇØ¿Ô´Ù (1). ´Ü¹éÁú ³»ÀÇ ½ÅÈ£Àü´Þ °æ·Î¸¦ ÀÌÇØÇÏ´Â °ÍÀº ÇÕ¼º»ý¹°ÇРȤÀº bioengineering ºÐ¾ß¿¡¼­ ÇʼöÀûÀÌ¸ç ±¤ÇÐÀûÀÎ ¹æ¹ýÀ» ÅëÇØ ´Ü¹éÁúÀÇ ±â´ÉÀ» Àç¼³°èÇÏ´Â °ÍÀº ½Ã°£Àû °ø°£Àû Á¶ÀýÀÇ Á¤È®¼ºÀ» °¡Áö°í »ý¹°ÇÐÀû ½Ã½ºÅÛÀ» Á¶Àý ÇÒ ¼ö Àֱ⿡ ¸Å¿ì Áß¿äÇÏ´Ù°í ÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù. ±× Áß¿¡¼­µµ ¿ÜºÎ ȯ°æÀÇ º¯È­¿¡ µû¸¥ ½Ã±×³ÎÀ» ÀÎÁöÇÏ¿© ¼¼Æ÷ ³»ÀÇ ´Ü¹éÁúÀÌ ÀûÀÀÇÒ ¼ö ÀÖµµ·Ï ÇÏ´Â ºû¿¡ ¹ÝÀÀÇÏ´Â ´Ü¹éÁú (light sensing protein)Àº ÇÕ¼º»ý¹°Çп¡¼­´Â »õ·Î¿î ¹ÙÀÌ¿ÀºÎÇ°À¸·Î¼­ ÁÖ¸ñ¹Þ°í ÀÖ´Ù. Light-oxygen-voltage (LOV) µµ¸ÞÀÎÀº ½ÅÈ£Àü´Þ¿¡ °ü¿©ÇÏ´Â Per-Arnt-Sim (PAS) ¶ó´Â ´Ü¹éÁúÀÇ ÇÑ ±×·ìÀ¸·Î¼­ ±×Áß¿¡¼­µµ Avena sativaÀÇ phototropin¿¡ Á¸ÀçÇÏ´Â As-LOV µµ¸ÞÀÎÀº C-terminal¿¡ Á¸ÀçÇÏ´Â helixÀÇ ±¸Á¶°¡ ºû¿¡ ÀÇÇØ °¡¿ªÀûÀ¸·Î º¯È­ÇÏ´Â °ÍÀ¸·Î ¾Ë·ÁÁ® ÀÖ°í ÀÌ¿¡ ´ëÇÑ ¸¹Àº ¿¬±¸°¡ ÀÌ¹Ì º¸°íµÇ¾ú´Ù (2). ÇÑÆí Bacillus subtilis¿¡¼­ À¯·¡ÇÑ YtvA ´Ü¹éÁúÀº dimer·Î ±¸¼ºµÇ¾î ÀÖÀ¸¸ç(3) ºû¿¡ ÀÇÇØ excited µÈ »óÅ°¡ ´Ù½Ã ground »óÅ·ΠÀüȯµÇ´Â dark regeneration µÇ´Â ¼Óµµ°¡ ´Ù¸¥ light sensing ´Ü¹éÁúµé¿¡ ºñÇØ ÇöÀúÇÏ°Ô ´À¸®´Ù°í ¾Ë·ÁÁ® ÀÖ´Ù (4). º» ¿¬±¸¿¡¼­´Â ºû¿¡ ¹ÝÀÀÇÏ´Â ÀÌ µÎ °¡Áö ´Ü¹éÁúÀ» DNA¿¡ bindingÇÏ´Â Tetracycline repressor (TetR)(5)¿¡ ¿£Áö´Ï¾î¸µÇÏ¿© »õ·Î¿î ½ºÀ§Ä¡ ´Ü¹éÁúÀ» ÇÕ¼ºÇÏ°í ±× ±â´ÉÀ» ºÐ¼®ÇÏ°íÀÚ ÇÏ¿´´Ù.


2. ¿¬±¸°á°ú


º» ¿¬±¸¿¡¼­´Â ±â´É¿¡ À־ ¿¬°üÀÌ ¾ø´Â µÎ Á¾·ùÀÇ ´Ü¹éÁúÀ» À¯ÀüÀÚ ÀçÁ¶ÇÕ ¹æ½ÄÀ» ÀÌ¿ëÇØ À¶ÇÕ ´Ü¹éÁúÀ» »ý¼ºÇÏ¿© ºû¿¡ ÀÇÇØ µÎ ´Ü¹éÁúÀÌ »óÈ£ÀÛ¿ëÇÏ°Ô µÊÀ» º¸¿©ÁÖ¾ú´Ù. Electrophoretic mobility-shift assays (EMSA)¿Í TetracyclineÀÇ Çü±¤ titration ½ÇÇè °á°ú´Â chromophore¿¡ Èí¼öµÈ ºûÀÌ TetRÀÇ N-terminalÂÊÀÇ DNA¿¡ °áÇÕÇÏ´Â µµ¸ÞÀÎÀ» °ÅÃÄ Tetracycline ¿¡ °áÇÕÇÒ ¼ö ÀÖ´Â C-terminal µµ¸ÞÀÎÀ¸·Î Àü´ÞµÇ¾î Tetracycline binding¿¡ ¿µÇâÀ» ÁÖ¾úÀ½À» º¸¿©ÁÖ¾ú´Ù. Èï¹Ì·Î¿î »ç½ÇÀº ºûÀÌ ½ºÀ§Ä¡ ´Ü¹éÁúÀÇ ±â´É¿¡ ¹ÌÄ¡´Â ¿µÇâÀÌ sensing ´Ü¹éÁú¿¡ µû¶ó ´Ù¸£°Ô ³ª¿Â´Ù´Â »ç½Ç·Î, YtvA-TetR ÀÇ °æ¿ì ºûÀÌ Á¸ÀçÇÒ ¶§ tightÇÏ°Ô Tetracycline¿¡ °áÇÕÀÌ ÀÌ·ç¾î Á³°í, As-TetRÀÇ °æ¿ì ºû¿¡ ÀÇÇØ Tetracycline °áÇÕÀÌ ¾àÇØÁüÀ¸·Î½á DNA binding ÇÏ´Â Á¤µµ°¡ ´Þ¶óÁüÀ» °üÂûÇÏ¿´´Ù. ÀÌ´Â ºû¿¡ ÀÇÇÑ ½ºÀ§Ä¡ ´Ü¹éÁúÀÇ ±â´ÉÁ¶ÀýÀÌ sensing ´Ü¹éÁúÀÌ °¡Áö´Â °íÀ¯ÀÇ ¸ÞÄ«´ÏÁòÀÇ ¿µÇâÀ» ¹Þ´Â ´Ù´Â »ç½ÇÀ» ¾Ë·ÁÁÖ°í ÀÖ´Ù.



±×¸² 1. YtvA-LOV¿Í As-LOV ´Ü¹éÁúÀÇ ±¸Á¶¿Í LOV domainÀÇ ÀÛ¿ë ±âÀü



±×¸² 2. Ytv-TetR°ú As-TetR ´Ü¹éÁúÀÇ Å¸°Ù DNA ¼­¿­ (tetO)¿¡ÀÇ binding ¾ç»óÀ» EMSA·Î ºÐ¼®ÇÔ. DNA¿¡ °áÇÕµÈ ´Ü¹éÁú°ú free DNAÀÇ ºñÀ²·ÎºÎÅÍ Ytv-TetRÀÇ °æ¿ì ºûÀÇ »óÅ¿¡¼­ DNA Çظ®°¡ Áõ°¡ÇÏ°í As-TetRÀÇ °æ¿ì´Â Dark »óÅ¿¡¼­ DNA Çظ®°¡ Áõ°¡ÇÔÀ» ¾Ë ¼ö ÀÖÀ½. ÀÌ´Â sensing ¸ðµâÀÇ ¼ºÁú±Ô¸í°ú ½ÅÈ£Àü´Þ ÃÖÀûÈ­¸¦ ÅëÇØ ½ºÀ§Ä¡ÀÇ ±â´ÉÀ» Á¶ÀýÇÒ ¼ö ÀÖÀ½À» º¸¿©ÁÜ.



±×¸² 3. YtvA-TetR ÀÇ °æ¿ì ºûÀÌ Á¸ÀçÇÒ ¶§ tightÇÏ°Ô Tetracycline¿¡ °áÇÕÀÌ ÀÌ·ç¾î Á³°í, As-TetRÀÇ °æ¿ì ºû¿¡ ÀÇÇØ °áÇÕÀÌ ¾àÇØÁö´Â °ÍÀ» Çü±¤ titration ½ÇÇèÀ» ÅëÇØ ±Ô¸íÇÔ. ÀÌ´Â ±×¸² 2¿¡¼­ Tetracycline¿¡ ÀÇÇØ Å¸°Ù DNA°¡ Çظ®µÇ´Â °á°ú°¡ ºû¿¡ ÀÇÇØ Á¶ÀýµÇ´Â °æÇâ°ú ÀÏÄ¡ÇÔÀ» º¸¿©ÁÖ°í ÀÖÀ½.


3. ¿¬±¸ÀÇ ¼º°ú ¹× ÀÇÀÇ


º» ¿¬±¸¸¦ ÅëÇØ ºû¿¡ ÀÇÇÑ ½ÅÈ£ÀÇ Àü´ÞÀÌ ±â´ÉÀûÀ¸·Î ¿¬°ü¼ºÀÌ ¾ø´Â LOV¿Í TetR ´Ü¹éÁú ³»¿¡¼­ Àü´ÞµÉ ¼ö ÀÖ°Ô ÇÔÀ¸·Î½á Flavin mononucleotide (FMN)À̶ó´Âchromophore¿¡¼­ ¹Þ¾ÆµéÀÎ ºû ½ÅÈ£°¡ TetR ´Ü¹éÁúÀÇ ±â´ÉÀ» Á¶ÀýÇÔÀ» º¸¿©ÁÖ¾ú°í, TetR ´Ü¹éÁú ³» µµ¸ÞÀÎ °£ÀÇ ½ÅÈ£°¡ N to C ±×¸®°í C to N ¾çÂÊ ¹æÇâÀ¸·Î Àü´ÞµÉ ¼ö ÀÖÀ½À» È®ÀÎÇÏ¿´´Ù. ¶ÇÇÑ ºû¿¡ ÀÇÇØ Ç×»ýÁ¦ÀÇ ¹ÝÀÀ¼ºÀ» Á¶ÀýÇÑ ÃÖÃÊÀÇ ¿¬±¸·Î¼­ »õ·Î¿î Ä¡·áÁ¦ °³¹ß Àü·«¿¡ ÀÀ¿ëµÉ ¼ö ÀÖÀ½À» º¸¿©ÁÖ¾ú´Ù. ÀÌ´Â ÇÕ¼º»ý¹°Çп¡¼­ ÇÊ¿ä·Î ÇÏ´Â bio-part·Î¼­ »ç¿ëÇÒ ¼ö ÀÖ´Â ´Ü¹éÁú·Î light sensing µµ¸ÞÀΰú DNA °áÇÕ ´Ü¹éÁú ¸ðµâÀ» ÀÀ¿ëÇÒ ¼ö ÀÖÀ¸¸ç ±× Ư¼ºÀ» ±Ô¸íÇÔÀ¸·Î½á ¼¼Æ÷³» »õ·Î¿î device¸¦ °³¹ßÇϴµ¥ È°¿ëÇÒ ¼ö ÀÖÀ» °ÍÀ¸·Î ¿¹»óµÈ´Ù. ÀÌ·¯ÇÑ °úÁ¤µéÀº ±Ã±ØÀûÀ¸·Î´Â ºÎÇ°È­µÈ ´Ü¹éÁú °£ÀÇ »óÈ£ÀÛ¿ë¿¡ ´ëÇÑ ÀÌÇظ¦ ¹ÙÅÁÀ¸·Î ÇÏ¸ç º» ¿¬±¸ÀÇ °á°ú´Â well-defineµÈ ºÐÇÒ Á¶¸³ °¡´ÉÇÑ ¹ÙÀÌ¿ÀºÎÇ°À» ¸¸µå´Âµ¥ °øÇå ÇÒ ¼ö ÀÖÀ» °ÍÀ¸·Î º»´Ù.


Âü°í¹®Çå

1. a) B. L. Taylor and I. B. Zhulin, Microbiol Mol Biol Rev 1999, 63, 479-506; b) Y. Z. Gu, J. B. Hogenesch and C. A. Bradfield, Annu Rev Pharmacol Toxicol 2000, 40, 519-561.
2. a) S. M. Harper, L. C. Neil and K. H. Gardner, Science 2003, 301, 1541-1544; b) J. Herrou and S. Crosson, Nat Rev Microbiol 2011, 9, 713-723; c) M. Salomon, J. M. Christie, E. Knieb, U. Lempert and W. R. Briggs, Biochemistry 2000, 39, 9401-9410; d) J. M. Christie, T. E. Swartz, R. A. Bogomolni and W. R. Briggs, Plant J 2002, 32, 205-219; e) U. Krauss, J. Lee, S. J. Benkovic and K. E. Jaeger, Microb Biotechnol 2010, 3, 15-23.
3. a) A. Moglich and K. Moffat, J Mol Biol 2007, 373, 112-126; b) M. Salomon, W. Eisenreich, H. Durr, E. Schleicher, E. Knieb, V. Massey, W. Rudiger, F. Muller, A. Bacher and G. Richter, Proc Natl Acad Sci U S A 2001, 98, 12357-12361; c) M. T. Alexandre, J. C. Arents, R. van Grondelle, K. J. Hellingwerf and J. T. Kennis, Biochemistry 2007, 46, 3129-3137.
4. A. Losi, B. Quest and W. Gartner, Photochem Photobiol Sci 2003, 2, 759-766
5. P. Orth, D. Schnappinger, W. Hillen, W. Saenger and W. Hinrichs, Nat Struct Biol 2000, 7, 215-219







Total:45 page:(3/3)
13 Á¤º¸ ISBC ¹ÚÅ׸®¾Æ ¿Ü¸·¼ÒÆ÷ü ±â¹Ý Ç×¾Ï Ä¡·á¿ë Ç¥ÀûÇü ¾à.. 18.08.30 3457
12 Á¤º¸ ISBC ÇÕ¼º »ý¹°ÇÐÀ» ÀÌ¿ëÇÑ Ãµ¿¬¹° Á¶ÇÕ »ýÇÕ¼º ±â¼úÀÇ.. 18.08.28 4154
11 Á¤º¸ ISBC ½´ÆÛ ¸®ÆľÆÁ¦ : ´Ù¾çÇÑ ±â´ÉÀÇ ÆéŸÀ̵å¿Í È¿¼Ò.. 18.08.28 3412
10 Á¤º¸ ISBC Leucine Zipper¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ ¼¼Æ÷ ³» ´Ü¹éÁú º¹ÇÕü .. 18.08.28 2154
9 Á¤º¸ ISBC ºû¿¡ ÀÇÇÑ Tetracycline ÀÇ Tet Repressor ´Ü¹é.. 18.08.23 2352
8 Á¤º¸ ISBC ´ëÀå±Õ ¹æÇâÁ· ¾Æ¹Ì³ë»ê »ýÇÕ¼º °æ·ÎÀÇ ´ë»ç°øÇÐ.. 18.08.21 2834
7 Á¤º¸ ISBC À¯ÀüÀÚ È¸·Î¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ ÃÊ°í¼Ó ÀÚ¿ø Ž»ö ½Ã½ºÅÛ 18.08.21 2973
6 Á¤º¸ ISBC »ýü³» ¾ÈÁ¤¼º°ú ¼¼Æ÷ ƯÀ̼ºÀÌ ÁõÁøµÈ Ç×±ÕÆéŸ.. 18.08.21 4033
5 Á¤º¸ ISBC FPP synthase À¶ÇմܹéÁú ±¸ÃàÀ» ÅëÇÑ ´ëÀå±Õ¿¡¼­.. 18.08.21 2490
4 Á¤º¸ ISBC Ç×±Õ ÆéŸÀ̵å ÁßÇÕüÀÇ ´ëÀå±Õ Ç¥¸é ¹ßÇö ¹× ÀÌ.. 18.08.20 3239
3 Á¤º¸ ISBC Æú¸® ±Û·çŸ¹Î ÅðÇ༺ ³úÁúȯ ´Ü¹éÁúÀÎ ATXN1°ú C.. 18.08.20 3034
2 Á¤º¸ ISBC ´ëÀå±Õ¿¡¼­ Àΰø sRNA¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ sRNA-¸Å°³ À¯ÀüÀÚ.. 18.08.20 3148
1 Á¤º¸ ISBC ÇÕ¼º Á¶Àý RNA¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ ´ëÀå±ÕÀÇ ´ë»ç °øÇÐ ¿¬±¸ 17.01.10 3887
[1] [2] [3]